实时荧光定量PCR技术(简称Real-time PCR)具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,受到生物学家们的青睐,促进了生命科学的发展。该技术是目前确定样品中DNA或RNA拷贝数*敏感、*准确的方法,还可进行多重反应,无污染,自动化程度高,在生物学的所有学科、医学基础和药学等领域得到广泛应用。本书在介绍实时荧光定量PCR技术原理基础上,集中论述该技术在各个领域中的应用,包括检测致病菌、检测病毒、检测基因突变和临床、遗传病研究、肿瘤研究、环境微生物检测、动物学研究、基因表达检测和流行病学等。在编写时力求方法尽可能详细,对每一种方法提供了反应体系、反应条件和结果分析,还附有参考文献,但读者在具体应用时,也不宜照本宣科,在实验过程中应因事制宜,对实验条件进行必要的优化。本书可供分子生物学、细胞生物学等生物学科,医学基础、药学等学科高年级本科生、研究生以及其他研究人员阅读参考。
实时荧光定量pcr技术(简称real-timepcr)具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,受到生物学家们的青睐,促进了生命科学的发展。该技术是目前确定样品中dna或rna拷贝数*敏感、*准确的方法,还可进行多重反应,无污染,自动化程度高,在生物学的所有学科、医学基础和药学等领域得到广泛应用。本书在介绍实时荧光定量pcr技术原理基础上,集中论述该技术在各个领域中的应用,包括检测致病菌、检测病毒、检测基因突变和临床、遗传病研究、肿瘤研究、环境微生物检测、动物学研究、基因表达检测和流行病学等。在编写时力求方法尽可能详细,对每一种方法提供了反应体系、反应条件和结果分析,还附有参考文献,但读者在具体应用时,也不宜照本宣科,在实验过程中应因事制宜,对实验条件进行必要的优化。本书可供分子生物学、细胞生物学等生物学科,医学基础、药学等学科高年级本科生、研究生以及其他研究人员阅读参考。
**章实时荧光定量pcr概述
**节实时荧光定量pcr的基本原理
一、引言
二、原理
第二节实时荧光定量pcr仪
一、applied biosystems公司的系列实时荧光定量pcr仪
二、iqtm 5实时荧光定量pcr仪
三、lightcycler实时荧光定量pcr仪
四、smartcycler system实时荧光定量pcr仪
五、mx3000p实时荧光定量pcr仪
六、rotor?gene实时荧光定量pcr仪
第三节实时荧光定量pcr中的荧光化学物质
一、荧光染料
二、水解探针
三、分子信标
四、荧光标记引物
五、双探针杂交
六、复合探针
第四节实时荧光定量pcr的定量方法
一、绝对定量
二、相对定量
第五节实时荧光定量pcr的实验方法
一、以dna为起始实验材料进行实时荧光定量pcr反应
二、以rna为起始实验材料进行实时荧光定量rt?pcr
第六节实时荧光定量pcr实验中应注意的问题
一、扩增子的设计
二、实验方案的优化
三、实践中应该注意的问题
小结
本章参考文献
第二章实时荧光定量pcr在病原菌检测中的应用
**节沙门菌的检测
一、引言
二、材料
三、方法
四、注意事项
五、应用
六、小结
本节参考文献
第二节在幽门螺杆菌检测中的应用
一、引言
二、基本原理
三、试验材料
四、方法
五、注意事项
六、应用
七、小结
本节参考文献
第三节在致病性大肠杆菌检测中的应用
一、检测dna样品中flich7基因的real?time pcr方法
二、检测rna样品中rfbe和eae基因的real?time pcr方法
本节参考文献
第四节在肉毒梭菌检测中的应用
方案一sybr green ⅰ real?time pcr方法检测a型肉毒梭菌
一、引言
二、原理
三、实验目的
四、实验材料和方法
五、实验结果
六、讨论
方案二用taqman real?time pcr对a型、b型和e型肉毒梭菌的检测
一、引言
二、原理
三、实验目的
四、实验材料和方法
五、实验结果
六、讨论
方案三taqman real?time pcr 在肉毒梭菌c型毒素基因检测中的应用
一、引言
二、原理
三、实验目的
四、实验材料和方法
五、实验结果
六、讨论
本节参考文献
第五节在嗜水气单胞菌检测中的应用
一、引言
二、材料
三、方法
四、应用
本节参考文献
小结
第三章实时荧光定量pcr在病毒检测中的应用
**节实时荧光定量rt?pcr在甲型h1n1检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、试验方法
五、结果判定
六、注意事项
七、小结
本节参考文献
第二节登革病毒的实时荧光定量rt?pcr检测
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、操作步骤
五、注意事项
本节参考文献
第三节h5n1亚型高致病性禽流感病毒的实时荧光定量rt?pcr检测
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、操作步骤
五、试验结果判定
六、注意事项
本节参考文献
第四节肠道病毒71型的实时荧光定量rt?pcr检测
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、操作步骤
五、结果分析
六、注意事项
本节参考文献
第五节多重实时荧光定量pcr在呼吸道病毒检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、试验原理与方法
五、结果判定
六、注意事项
七、小结
本节参考文献
第六节实时荧光定量pcr用于重组杆状病毒滴度检测的研究
一、引言
二、试验目的
三、材料
四、方法
五、结果及分析
六、注意事项
七、小结
本节参考文献
第七节实时荧光定量pcr在hiv检测中的应用
一、引言
二、基本原理
三、试验材料
四、方法
五、试验结果判定
六、注意事项
七、应用
本节参考文献
第八节在检测hbv和hcv方面的应用
a? 实时荧光定量pcr在检测hbv方面的应用
一、引言
二、材料和方法
三、小结
b?实时荧光定量pcr在检测hcv方面的应用
一、引言
二、材料和方法
三、小结
本节参考文献
第四章实时荧光定量pcr检测基因突变及临床应用
**节实时荧光定量pcr检测基因突变在遗传病诊断中的应用
一、引言
二、应用巢式pcr和taqman mgb探针real?time pcr技术检测经典型苯丙酮
尿症(pku)
三、应用sybr green ⅰ real?time pcr技术检测慢性骨髓增殖性疾病
第二节实时荧光定量pcr检测基因突变在肿瘤诊断、治疗和预后中的应用
一、引言
二、应用asb?pcr方法检测kras基因突变
第三节实时荧光定量pcr检测基因突变在耐药病原体监测中的应用
一、引言
二、通过杂交探针实时荧光定量pcr检测临床分离的结核分枝杆菌的异烟肼抗性
三、fret实时荧光定量pcr快速准确检测幽门螺杆菌耐克拉霉素相关的基因点
突变
本章参考文献
第五章实时荧光定量pcr在遗传病研究中的应用
**节实时荧光定量pcr识别snp的方法
一、原理
二、常用的突变识别方法
本节参考文献
第二节实时荧光定量pcr在snp分型中的应用
一、引言
二、试验目的
三、试验原理
四、试验材料
五、试验方法
六、结果与讨论
本节参考文献
第三节等位基因特异性实时荧光定量pcr在dna库中等位基因定量检测中的
应用
一、引言
二、试验目的
三、试验原理
四、试验材料
五、实验方法
六、结果与讨论
本节参考文献
第四节等位基因特异性pcr结合分子信标实时荧光定量pcr在肿瘤和线粒体疾
病检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、试验原理
四、试验材料
五、试验方法
六、结果与讨论
本节参考文献
第六章实时荧光定量pcr在肿瘤中的应用
**节实时荧光定量pcr在肿瘤早期诊断中的意义
方案1pescadillo在乳腺癌组织中的表达及其临床意义
一、试验目的
二、基本原理
三、实验材料
四、实验方法
五、实验结果
六、小结
方案2实时荧光定量pcr检测microrna在不同肿瘤细胞中的表达
一、实验目的
二、基本原理
三、材料
四、方法
五、结果
六、小结
第二节实时荧光定量pcr在肿瘤预后评估中的应用
方案1实时荧光定量pcr检测upa、pai?1、timp?1 mrna表达与乳腺癌预
后的关系
一、实验目的
二、实验材料
三、实验方法
四、实验结果
五、小结
方案2实时荧光定量pcr检测upa mrna表达在her2阳性乳腺癌预后中的
意义
一、实验目的
二、实验材料
三、实验方法
四、实验结果
五、小结
第三节实时荧光定量pcr在药物疗效判断中的作用
一、实验目的
二、材料
三、方法
四、结果
五、小结
第四节实时荧光定量pcr在基因表达调控中的应用
一、实验目的
二、实验材料
三、实验方法
四、实验结果
五、小结
本章参考文献
第七章实时荧光定量pcr在环境微生物检测中的应用
**节实时荧光定量pcr在检测土壤微生物中的应用
一、引言
二、试验目的
三、原理
四、土壤微生物dna提取方法汇总
五、操作步骤
六、实时荧光定量pcr在土壤中病原菌定量检测中的应用
七、实时荧光定量pcr在土壤中生防菌的动态变化监测中的应用
本节参考文献
第二节实时荧光定量pcr 技术在空气微生物检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、试验材料与方法
四、小结
本节参考文献
第三节实时荧光定量pcr在检测水源微生物方面的应用
一、引言
二、基本原理
三、研究进展
四、实验方法
五、实验结果
六、结果分析
本节参考文献
第八章实时荧光定量pcr在动物学研究中的应用
**节实时荧光定量pcr在动物感染性疾病监测和检测中的应用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法与步骤
五、注意事项
六、应用
本节参考文献
第二节实时荧光定量pcr在转基因动物检测中的应用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法与步骤
五、注意事项
六、应用
本节参考文献
第三节实时荧光定量pcr在突变动物检测和突变品系培育中的应用
一、引言
二、sybr green ⅰ实时荧光定量pcr在hla?1502基因检测中的应用
三、实时荧光定量pcr在白化突变鼠检测中的应用
四、注意事项
五、应用
本节参考文献
第四节实时荧光定量pcr在药物效果评价动物实验中的应用
一、引言
二、实时荧光定量pcr在马传染性贫血病毒疫苗效果评价中的应用
三、利用实时荧光定量pcr评价以离子交换色谱纯化抗体时外源病毒因子的清除效果
四、注意事项
五、应用
本节参考文献
第九章实时荧光定量pcr在基因表达检测和流行病学中的应用
**节实时荧光定量pcr在分析基因差异表达中的应用
一、实时荧光定量pcr实验的设计和优化
二、实时荧光定量pcr应用实例
三、实验注意事项
四、小结
本节参考文献
第二节实时荧光定量pcr检测car基因在小鼠肺发育不同阶段中的表达
一、引言
二、材料及方法
三、数据分析
本节参考文献
第三节实时荧光定量pcr在流行病学中的应用
一、微生物的检测和鉴定
二、耐药分析
三、dna甲基化、单核苷酸多态性及突变分析
四、肿瘤基因检测
五、基因表达差异分析
六、微生态中微生物种的相对定量
本节参考文献
天体与天象 本书特色本书主要内容包括天体、天象的基本介绍,四季星空及中国境内可见星座的识别方法,普及型天文望远镜的使用方法,初级天体、天象摄影技巧等。天体与天象...
自然史 本书特色 人类文明史中的不朽巨著博物学大师精彩演绎,独特视角,优美文笔家畜\野兽\飞禽诗人把鹰誉为“天王”,把猫头鹰称为“天后”。猫头鹰惧怕阳光,因此它...
中华气象谚语大观 本书特色 《中华气象谚语大观》适合气象工作者、地理工作者、气象爱好者、文教工作者、农林牧副渔和图书馆藏等部门参阅使用。中华气象谚语大观 内容简...
跨越38.42光年,美国军方与外星人长达67年的秘密合作!两艘坠毁的外星飞船,一个存活的外星人,罗斯维尔事件为地球人类打开了通往
第三次气候变化国家评估报告 本书特色 第三次气候变化国家评估报告编写委员会编著的《第三次气候变化国家评估报告(精)》是政府支持与专家驱动。政府通过编写工作领导小...
10000个科学难题;物理学卷 本书特色 《10000个科学难题(物理学卷)(精)》是由科学出版社出版的。10000个科学难题;物理学卷 内容简介 本书是《10...
守护大熊猫 本书特色 《守护大熊猫》这部图册,由中国野生动物保护协会主持策划。书中史诗般地展现了大熊猫的演化和发现,大熊猫的生活习性,大熊猫今日生活的家园,国内...
现代光学基础 目录 第1章 费马原理与变折射率光学1.1 惠更斯原理1.2 折射率1.3 光程1.4 费马原理1.5 费马原理与成像1.6 自然变折射率1.7 ...
武陵山区珍稀特色植物 本书特色 本书收录了246种该区域的主要珍稀植物物种,详细阐述了每种珍稀特色植物的生境和用途,图文并茂,不仅是研究人员及管理工作者的重要参...
中国上古天文 内容简介 上古之中国,既有天文学,所谓“钦若昊天”,求明了天地自然之现象,而从顺之,以引导日常生活。研究中国上古天文,本身是一个颇有意义的课题,并...
化学海洋学 本书特色 本书较为系统地阐述了海水化学组成、海水中的溶解气体、海水中二氧化碳一碳酸盐体系、主要生源要素的生物地球化学循环、海洋中的痕量金属、海洋有机...
粉末多晶X射线衍射技术原理及应用 本书特色 《粉末多晶X射线衍射技术原理及应用》:青年科技创新人才学术文库粉末多晶X射线衍射技术原理及应用 内容简介 本书共分1...
科学精神的形成 内容简介 本书是作者科学哲学方面的代表作,集中体现了巴什拉犀利、明确的思想性格和凝练、晓畅的文风,深入探讨了前科学精神的各种根本的谬误,揭示了前...
再也没有比引发孩子的科学好奇心更重要的事情了,肖恩•康纳利就知道该怎么做——设计一些生动有趣、能够亲自动手,但看起来有些“
地层古生物论文集 第二十八辑:科技部基础性工作专项资金项目《中国典型地层剖面的立典研究》专刊 内容简介 本书收录了科技部基础性工作专项资金项目《中国典型地层剖面...
古脊椎动物学-第四版 本书特色 该书从脊椎动物的起源及古脊椎动物的研究方法开始,按脊椎动物的系统演化顺序,系统讲解了脊椎动物的演化历史、解剖特征的重大进化、古生...
电磁场与电磁波 内容简介 本书系统地描述了电磁场和电磁波的基本规律。全书内容包括:静电场与恒定电场、静电场的解法、恒定磁场、时变电磁场、正弦平面电磁波在无界空间...
世界图景的机械化 目录 德译本前言英译本前言I古代的遗产**章 导言第二章 希腊自然哲学思想的主要流派**节 毕达哥拉斯主义第二节 爱利亚派第三节 希腊微粒理论...
深水砂岩新论-成因.识别.触发机制与储层性质 本书特色 G.Shanmugam编著的《深水砂岩新论(成因识别触发机制与储层性质)》是笔者之前著作《深水过程与相模...
去最美的地方看最怪的动物 本书特色 在*美的地方,一定有*美的动物,在这些美丽的地方,动物本身就成了*美丽的风景,对这个星球,我们爱得深沉,因为那些美丽的风景,...